在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和生物學(xué)研究領(lǐng)域,為了更清晰地觀察細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu),常常需要借助特殊的染色技術(shù)。PAS糖原染色便是其中一種重要的方法,它如同為細(xì)胞內(nèi)的糖原編寫了的“顯色密碼”,幫助科研人員和醫(yī)生更好地了解細(xì)胞的生理和病理狀態(tài)。
PAS糖原染色,即過碘酸-雪夫(Periodic Acid-Schiff)染色,其原理基于過碘酸的氧化作用。過碘酸能將細(xì)胞內(nèi)的糖原等多糖物質(zhì)中的乙二醇基氧化成二醛基,這些二醛基進(jìn)而與雪夫試劑中的無色品紅亞硫酸復(fù)合物結(jié)合,形成紫紅色的化合物,從而使糖原在顯微鏡下呈現(xiàn)出鮮艷的紫紅色,便于觀察和識別。
PAS糖原染色的操作步驟相對嚴(yán)謹(jǐn)。首先要對樣本進(jìn)行固定,常用的固定液如甲醛溶液,可使細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定。接著進(jìn)行過碘酸氧化處理,控制好氧化時(shí)間和溫度是關(guān)鍵,一般在室溫下氧化5-10分鐘,確保多糖被充分氧化。隨后用蒸餾水沖洗,去除多余的過碘酸。再將樣本浸入雪夫試劑中染色15-30分鐘,使氧化后的糖原與試劑充分反應(yīng)。最后用亞硫酸水溶液漂洗,去除未結(jié)合的試劑,脫水、透明后封片,即可在顯微鏡下觀察。
在臨床應(yīng)用方面,PAS糖原染色有著廣泛的用途。在血液系統(tǒng)疾病診斷中,它可用于鑒別急性淋巴細(xì)胞白血病和急性髓細(xì)胞白血病。急性淋巴細(xì)胞白血病的原始淋巴細(xì)胞常呈強(qiáng)陽性反應(yīng),而急性髓細(xì)胞白血病的原始細(xì)胞則多為陰性或弱陽性。在肝臟疾病診斷中,通過觀察肝細(xì)胞內(nèi)糖原的含量和分布,輔助判斷肝臟的代謝功能和病變情況,如肝糖原累積癥時(shí),肝細(xì)胞內(nèi)糖原大量堆積,PAS染色呈強(qiáng)陽性。此外,在腫瘤病理診斷中,也可利用PAS染色來區(qū)分不同類型的腫瘤細(xì)胞,因?yàn)槟承┠[瘤細(xì)胞的糖原代謝會(huì)發(fā)生異常改變。
PAS糖原染色為醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷提供了重要的依據(jù),讓我們能夠從細(xì)胞層面深入了解疾病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。